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Some Biochemical properties of polyphenoloxidase from spearmint (Mentha arvensis)

机译:留兰香多酚氧化酶的一些生化特性

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摘要

Polifenoloxidase (PPO, EC 1.14.18.1) extraída de folhas de Mentha arvensis foi isolada por precipitação com (NH4)2SO4 e diálise extensiva. Seu pH e temperatura ótimos variaram com o substrato. A PPO apresentou atividade com vários difenóis. Valores de Km foram 0,825; 0,928 e 7,41 mM para ácido caféico, 4-metilcatecol e catecol, respectivamente. Na inativação térmica, 50% da enzima foi inativada após 60 e 15 segundos a 70 e 75ºC, respectivamente. A medida de atividade residual mostrou um efeito estabilizante de sacarose a várias temperaturas e uma energia de ativação (Ea) para inativação aumentando com a concentração de sacarose de 0 a 40% (p/p). Valores de energias de ativação de 78,13; 80,37; 82,79 and 81,00 kJ/Mol foram encontradas para 0, 15, 30 e 40% de sacarose, respectivamente. A PPO foi inibida pelos ácidos ascórbico, benzóico, cinamico, ferulico, p-cumárico, protocatéquico, além de metabisulfito de sódio, resorcinol e pirogalol. Os valores de Ki mostram que o ácido ascórbico foi o mais efetivo inibidor. O tipo de inibição foi determinado para cada inibidor.
机译:通过用(NH4)2SO4沉淀并进行广泛的透析分离出从薄荷脑中提取的多酚氧化酶(PPO,EC 1.14.18.1)。其最佳pH和温度随底物而异。 PPO具有几种二酚的活性。 Km值为0.825;咖啡酸,4-甲基邻苯二酚和邻苯二酚分别为0.928和7.41 mM。在热灭活中,分别在70和75ºC下60和15秒后50%的酶被灭活。残余活性的量度显示了蔗糖在各种温度下的稳定作用,并且随着蔗糖浓度从0%到40%(w / w)的增加,用于失活的活化能(Ea)增加。活化能值为78.13; 80.37;分别发现0、15、30和40%的蔗糖分别为82.79和81.00 kJ / Mol。除焦亚硫酸钠,间苯二酚和邻苯三酚外,PPO还被抗坏血酸,苯甲酸,肉桂酸,阿魏酸,对异丙苯甲酸,原儿茶酸抑制。 Ki值表明抗坏血酸是最有效的抑制剂。确定每种抑制剂的抑制类型。

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